Культуры хондроцитов
При выборе хрящевой ткани для исследований in vitro необходимо учитывать несколько важных моментов. Состав матрикса и метаболическая активность хондроцитов варьируют в разных суставах, а последняя также зависит от глубины расположения хондроцитов в ткани. Эти данные были получены в ходе нескольких экспериментов, в которых изучались изолированные субпопуляции хондроцитов из зон хряща различной глубины. Обнаружен ряд морфологических и биохимических различий между культивируемыми хондроцитами, расположенными в поверхностных и глубоких слоях суставного хряща. Поверхностные клетки синтезируют редкий, обедненный протеогликанами фибриллярный матрикс, тогда как более глубокие клетки вырабатывают матрикс, изобилующий фибриллами и протеогликанами (Aydelotte М., Kuettner К.Е., 1988; Archer С. et al., 1990). Более того, поверхностные клетки вырабатывают относительно больше мелких неагрегированных протеогликанов и гиалуроновую кислоту и относительно меньше аггрекана и кератан сульфата, чем более глубоко расположенные хондроциты (Manicourt D., Pita J., 1988; Siczkowski M., Watt Е, 1990; KorverT. etal., 1992). Другой важной отличительной чертой метаболизма хондроцитов, изолированных из зон хряща разной глубины, является ответ на экзогенный стимул. По данным М. Aydelotte и соавторов (1988, 1991), хондроциты быка из поверхностной зоны хряща были более чувствительны к ИЛ-1, чем клетки глубокой зоны.
Поведение клеток также зависит от локализации ткани. Хондроциты хрящей ребер и ушей, взятые от одного и того же животного, по-разному реагируют на факторы роста, такие, как фактор роста фибробластов (ФРФ) и ТФР-р. ФРФ увеличивал включение тимидина, пролина и лейцина в культуру хондроцитов ребра, но не уха. ТФР-Р увеличивал включение тимидина в хондроциты хряща ребра и уха, но не влиял на включение тимидина и пролина в хондроциты уха (Lee J. et al., 1997). Хрящевые клетки, полученные из зон, несущих наибольшую нагрузку, отличаются от таковых из участков с низкой нагрузкой на хрящ. Так, хондроциты зрелого хряща коленного сустава овцы из центральной области суставной поверхности болыиеберцовой кости, не покрытой мениском, которая переносит наибольшую нагрузку in vivo, меньше синтезируют аггрекан, но больше декорин, чем клетки из зон, покрытых мениском (Little С., Ghosh Р., 1997). Авторы также подчеркивают важность использования хряща из идентичных зон суставов при исследовании синтетической функции суставов.