Взвесь хондроцитов в жидкой фазе
Взвесь хондроцитов в жидкой фазе. Прикрепление клеток к пластиковым сосудам, в которых осуществляется культивирование хондроцитов, можно предотвратить покрытием их стенок раствором метилцеллюло-зы, агарозы, гидрогеля (поли-2-гидроксиэтилметакрилат) или смесью коллаген-агароза (Reginato A. et al., 1994). В этих условиях хондроциты формируют скопления и синтезируют главным образом аггрекан и тка-неспецифические коллагены (II, IX, XI типы). Обычно обнаруживают два типа клеток. Расположенные в центре клетки сохраняют сферическую форму, окружены хорошо развитым ВКМ, что подтверждается данными гистохимического и ультраструктурного исследований. На периферии хондроциты имеют дискоидные очертания, окружены редким ВКМ; о функциональных особенностях таких клеток известно мало.
Возможна культивация хондроцитов на микроносителях, поддерживаемых во взвеси; в качестве микроносителей используют декстрановые бусины (цитодекс), покрытые коллагеном декстрановые бусины (цито-декс III), беспоровые микросферы коллагена I типа (целлаген) (Freed L. etal., 1993; FronrozaC. etal., 1996). В этих условиях культивирования хондроциты прикрепляются к поверхности микроносителя, сохраняют свою сферическую форму и вырабатывают матриксно-подобный материал. Более того, использование целлагена способствует пролиферации хондроцитов и реэкспрессии нормального фенотипа (Fronroza С. et al., 1996). Поэтому культивирование хондроцитов на микросферах целлагена можно использовать для восстановления фенотипа клеток перед трансплантацией.Еще одним методом культивирования взвеси хондроцитов в жидкой среде является их культивирование в виде плотных шариков, состоящих из клеток (0,5-1 ■ 10б), полученных путем центрифугирования. Такие хондроциты способны продуцировать матрикс, содержащий большое количество протеогликанов, коллагена II типа, но не коллагена I типа, что подтверждено гистологическими, иммуногистохимическими и количественными методами (Хи С. et al., 1996; Ronziere М.-С. et al., 1997).