Культура хондропитов
Культура хондропитов с мутированными, или удаленными генами — удобная модель для исследования их физиологической функции. Эта модель особенно подходит для изучения роли специфических молекул в организации хрящевого матрикса или исследования эффектов различных ре-гуляторных факторов на метаболизм хряща. Хондроциты с удаленным геном коллагена IX типа синтезируют коллагеновые фибриллы шире, чем нормальные, что свидетельствует о том, что коллаген IX типа регулирует диаметр фибрилл (Mallein-Gerin F. et al., 1995). Как отмечалось в главе 1, недавно обнаружена мутация гена COL2A,, кодирующего коллаген II типа в семьях с первичным генерализованным OA. Для исследования влияния мутантного коллагена II типа на суставной матрикс R. Dharmrvaram и соавторы (1997) выполнили трансфекцию («заражение» чужой нуклеиновой кислотой) дефектного COL2A, (аргинин в положении 519 заменен на цистеин) в фетальные хондроциты человека in vitro.
Система кокультур. В суставе хрящ взаимодействует с клетками других типов, содержащимися в синовиальной мембране, синовиальной жидкости, связках, субхондральной кости. На метаболизм хондроцитов могут влиять различные растворимые факторы, синтезируемые перечисленными клетками. Так, при артритах суставной хрящ разрушается про-теолитическими ферментами и свободными радикалами, которые вырабатываются синовиальными клетками. Поэтому были разработаны модели для изучения сложных взаимодействий между хрящом и окружающими тканями, которые получили название кокультуры.
S. Lacombe-Gleise и соавторы (1995) культивировали хондроциты кролика и остеобласты в системе кокультур (COSTAR), в которой клетки были отделены микропористой мембраной (0,4 мкм), позволявшей обмен между клетками двух типов без каких-либо прямых контактов. Это исследование продемонстрировало способность остеобластов стимулировать рост хондроцитов посредством растворимых медиаторов.