Инкубация культуры хондроцитов
Инкубация культуры хондроцитов, полученных от больных с OA, с ТФР-р вызывает значительное увеличение синтеза протеогликанов этими клетками. Стимуляция ТФР-Р нормальных хондроцитов вызывает увеличение синтеза протеогликанов только после многих дней инкубации. Возможно, это время необходимо для изменения фенотипа клеток под влиянием ТФР-Р (например, для изменения так называемой компартментализации протеогликанов: вновь созданные протеогликаны локализуются только вокруг хондроцитов).
Известно, что активация синтеза факторов роста, в частности ТФР-Р, — важное звено в патогенезе фиброза почек и печени, формировании рубца при заживлении раны (Border W.A., Ruoslahti Е., 1992). Увеличение нагрузки на хондроциты in vitro приводит к гиперпродукции ТФР-Р, тогда как уменьшение синтеза протеогликанов после иммобилизации конечности может быть нивелировано ТФР-р (Zerath Е. et al., 1997). ТФР-Р индуцирует формирование остеофитов в краевой зоне суставов как механизм приспособления к изменению нагрузки. ИЛ-1, вызывая умеренный воспалительный процесс в синовии в ответ на повреждение сустава, способствует образованию хондроцитов с измененным фенотипом, которые вырабатывают избыточное количество (van den Berg W.B. et al., 1999).
Повторные локальные инъекции рекомбинантного ТФР-Р в высоких концентрациях привела к развитию OA у мышей линии С57В1 — образованию остеофитов, что характерно для OA человека, и значительной потере протеогликанов в зоне «волнистой границы» (van den Berg W.B. et al., 1999).
Для понимания того, как избыток ТФР-Р вызывает известные изменения хряща, необходимо заметить, что экспозиция ТФР-Р индуцирует характерный фенотип хондроцита с изменением подкласса синтезируемых протеогликанов и нарушением нормальной интеграции элементов ВКМ. И ИФР-1, и ТФР-р стимулируют синтез протеогликанов хондроцитами, культивируемыми в алгинате, однако последний еще и индуцирует так называемую компартментализацию протеогликанов (van Osch G.J.V.M. et al., 1998). Более того, обнаружено, что ТФР-р повышает уровень коллагеназы-3 (ММП-13) в активированных хондроцитах, что расходится с общим представлением о ТФР-Р, как факторе, который, наоборот, уменьшает высвобождение деструктивных протеаз (Moldovan F. et al., 1997). Хотя не известно, участвует ли ТФР-р-индуци-рованный синтез ММП-13 в патогенезе OA. ТФР-р не только стимулирует синтез протеогликанов, но и способствует их отложению в связках и сухожилиях, увеличивая скованность и уменьшая объем движений в суставах (Kawaguchi Н. et al., 1992; Hoshi К. et al., 1997).
КМП — члены суперсемейства ТФР-р. Некоторые из них (КМП-2, КМП-7 и КМП-9) обладают свойством стимулировать синтез протеогликанов хондроцитами (Luyten F.P. et al., 1992; Lietman S.A. et al., 1997; van Beuningen H.M. et al., 1998). КМП осуществляют свои эффекты путем связывания со специфическими рецепторами на поверхности клеток; сигнальные пути ТФР-Р и КМП несколько отличаются (Yamashita Н. etal., 1996; AttisanoL., WranaJ.L., 1998).